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產品時間：2020-04-14
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產品貨號 | 產品名稱 | 品牌 |
11363735001 | Hybridoma Fusion and Cloning Supplement | life-ilab |
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11363735001 羅氏
雜交瘤融合和克隆補充
分析證書（COA） 公告（PDF）
貨號與規(guī)格 庫存 包裝規(guī)格 安全性
價格（CNY） 數(shù)量
11363735001
需要從國外調貨，預計到貨時間2020年7月6日- 詳情 10毫升
安全數(shù)據(jù)表
相關類別 雜交瘤媒體補充劑， 雜交平臺， ITS等補品， 無血清培養(yǎng)基， 細胞培養(yǎng)，
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形成 解
打包 pkg 10毫升（50x）
制造商 沒有。 羅氏
運入 干冰
儲存溫度 −20°攝氏度
產品描述
一般說明
培養(yǎng)基補充劑，由白蛋白，胰島素，轉鐵蛋白，細胞因子，膽固醇源，其他定義的有機和無機化合物以及胎牛血清組成（終濃度：0.5％）。
HFCS包含人類蛋白質。已對從中分離出人類蛋白質的原料進行了乙型肝炎表面抗原（HBsAg）和HIV-1 / 2抗體測試，發(fā)現(xiàn)呈陰性（根據(jù)當前的質量控制程序）。
應用
雜交瘤融合和克隆補充劑（HFCS）被用作正常培養(yǎng)基的補充劑，以支持融合后和克隆過程中B細胞雜交瘤的生長。HFCS替代飼養(yǎng)細胞。解凍儲存在液氮中的細胞后，它還可用于優(yōu)化雜交瘤細胞的生長。[1] [2]
物理形態(tài)
溶液（50x濃縮，pH 7.4）；通過孔徑為0.2μm的膜過濾
準備說明
工作濃度： HFCS（50x）用基礎培養(yǎng)基稀釋為1:50（v / v）。強烈建議您使用RPMI1640。終培養(yǎng)基也應包含L-谷氨酰胺和碳酸氫鈉。
分析筆記
生物活性：測定了雜交瘤細胞系的高克隆效率。
其他注意事項
僅用于生命科學研究。不可用于診斷。
Hybridoma fusion and cloning supplement （HFCs）（50×） 媒體補編 Solution（50×concentrated）
Cat. No. 011 363 735 001 y Version 18
Content version: March 2016 10 ml
產品描述 綜述雜交瘤融合和克隆補充（HFCS）是一種 低血清含培養(yǎng)基補充 胎牛血清（FCS）的替代 雜交瘤細胞。 HFCS是專門為優(yōu)化細胞生長而設計的 低血清細胞培養(yǎng)中新融合雜交瘤的篩選和克隆 媒體。 HFCS的特殊組成進一步避免了 使用飼養(yǎng)細胞的必要性。 成分培養(yǎng)基補充劑，包括白蛋白、胰島素， 轉鐵蛋白，細胞因子，膽固醇來源，其他 界定的有機和無機化合物與胎兒 小牛血清（終濃度：0.5%）。 HFCS含有人類蛋白質。原料來自 人類的蛋白質被分離出來 乙肝表面抗原檢測 （HBsAg）以及HIV-1和HIV-2抗體和 發(fā)現(xiàn)是陰性的。 生物學的 活動 每一批都要進行高克隆效率的檢測 雜交瘤細胞（見圖1）。 配方•溶液（50×濃度，pH7.4）； •通過0.2 m孔徑膜過濾； •內毒素（LAL）：10 EU/ml，檢測支原體 工作 濃度 HFCS濃縮液（50×）用1:50（v/v）稀釋 基本培養(yǎng)基。強烈建議使用RPMI 1640年。終培養(yǎng)基還應含有L-谷氨酰胺和
-巰基乙醇。 應用HFCS是一種血清替代物，含有FCS和 血清白蛋白、胰島素、轉鐵蛋白、細胞因子、膽固醇源和其他特異性 有機和無機化合物。 HFCS避免了血清在細胞培養(yǎng)中的額外使用 新融合雜交瘤生長培養(yǎng)基 源自SP 2/0，P3X63Ag8.653。 HFCS的特殊組成進一步避免了 飼養(yǎng)細胞的使用。新融合的生長速度 HFCS輔助培養(yǎng)基中的雜交瘤細胞是 比人內皮細胞要高得多 培養(yǎng)上清液（HECS）-或補充的FCS 中等。雜交瘤HFCS克隆方法的研究 補充培養(yǎng)基比補充培養(yǎng)基更有效率（圖1）。 工具包存儲/ 穩(wěn)定性 未開封溶液在1525°C下穩(wěn)定，直到 標簽上的有效期。 注：建議配制適當?shù)牡确?，避免反復凍?/p>
程序和所需材料 推薦 媒體 配方 請在下表中找到推薦的 小鼠源性培養(yǎng)基配方 雜交瘤。 1每種培養(yǎng)基配方可能含有進一步的補充劑，例如抗生素、L-谷氨酰胺- 巰基乙醇丙酮酸鈉，非必需 氨基酸。 2含氨基蝶呤的帽子中氨基蝶呤的濃度 介質可以通過使用 分離濃縮試劑[補充羥色胺培養(yǎng)基；氨基蝶呤（250×）]。這樣就可以稀釋氨基蝶呤。 3.雜交瘤從含血清培養(yǎng)基轉移到無血清培養(yǎng)基 NUTRIDOMA-SP（需要斷奶）（見 備注4）。 4建議將NUTRIDOMA-SP用于SP 2/0 衍生性雜交瘤。 階躍介質配方 高血清1低血清1游離血清1 融合•任何基底 中等（例如。， RPMI 1640） •未來作戰(zhàn)系統(tǒng)（用于 再懸浮 之后的細胞 融合） 任何基礎培養(yǎng)基（如RPMI 1640） 冷凍•含F(xiàn)CS •10%二甲基亞砜（v/v） 選擇2•任何基礎 中等（例如。， RPMI 1640） •10%未來作戰(zhàn)系統(tǒng)（v/v） •10%BM 條件H1 （伏/伏） •HAT介質補充，1× •任何基底 中等（例如。， RPMI 1640） •1×HFCS •HAT介質補充，1× •任何基底 中等（例如。， RPMI 1640） •1個NUTRIDOMA-CS •HAT介質補充，1× 篩選•參見選擇 克隆•任何基礎 中等（例如。， RPMI 1640） •10%未來作戰(zhàn)系統(tǒng)（v/v） •10%BM 條件H1 （伏/伏） •任何基底 中等（例如。， RPMI 1640） •1×HFCS •任何基底 中等（例如。， RPMI 1640） •1個NUTRIDOMA-CS 雜交瘤 文化 •任何基底 中等（例如。， RPMI 1640） •10%未來作戰(zhàn)系統(tǒng)3（v/v） •RPMI 1640型/ DMEM（1:1） •0.5–1%FCS3 （伏/伏） •營養(yǎng)學 •RPMI 1640型/ DMEM（1:1）4 •NUTRIDOMASP 1%
選擇成功后介紹 陽性組織培養(yǎng)上清液已通過第yi次篩選，下一步是克隆 產生抗體的細胞。單細胞克隆確保 產生感興趣抗體的細胞 單克隆抗體的分泌 保持穩(wěn)定。 單細胞克隆有幾種方法，例如。， 通過限制稀釋，在軟瓊脂中生長，流式細胞術。 限制稀釋法克隆單細胞 如下所示。 盡管如此，每一次嘗試都是為了確保 在電鍍之前，電池處于單電池懸浮狀態(tài) 不能保證殖民地不會出現(xiàn) 從兩個粘在一起的牢房里。因此，限制性稀釋克隆少應該做兩次 （“再克隆”）產生克隆種群。 處理 說明 •如果許多雜交瘤必須同時克隆 時間，可能值得用 使用10毫升或更大的吸管。一滴就夠了 吸管將輸送大約100微升。 •克隆將在4天后開始出現(xiàn)，并且應該 準備在第7-10天開始放映。 •可以從包含多個 克隆體以及僅包含單個 克隆人。 程序請參考下表。 注：雜交瘤應健康迅速 在克隆時生長的。
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